DMEM基础培养基（高糖,含HEPES，含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，不含丙酮酸钠）

DMEM, high glucose，即DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）高糖培养基，是在MEM培养基基础上改良而来，目前已广泛应用于各种细胞的培养。DMEM高糖培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞。可用于多种哺乳动物原代细胞的培养，例如原代成纤维细胞、神经细胞、神经胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞等，也可以用于一些细胞系的培养，例如Hela、293、Cos-7及PC-12等。

本产品含多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等成分，不含蛋白质或生长因子，需根据细胞种类添加5-10%血清或无血清添加物使用。本产品是根据ATCC 30-2002货号改良的DMEM高糖培养基，含1.5 g/L碳酸氢钠，添加丙酮酸钠。

本产品经0.1 μm滤膜过滤除菌，pH 7.0-7.4，含25 mM D-葡萄糖，1.5g/L 碳酸氢钠，添加4.0 mM L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，含酚红指示剂，含HEPES缓冲体系，不含丙酮酸钠。

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，是一种细胞培养添加剂，可替代细胞培养基中等摩尔的L-谷氨酰胺。该物质在水溶液中十分稳定，不会自发降解，而是通过细胞分泌的一种肽酶缓慢降解以释放谷氨酰胺，再被细胞吸收利用。

特点：

    DMEM 与其他培养基的不同之处在于其含有相当于初始 Eagle 最低必需培养基 4 倍浓度的氨基酸和维生素。DMEM 最初采用低浓度葡萄糖 (1 g/L) 和丙酮酸钠配制，但通常在含/不含丙酮酸钠的高糖环境下使用。DMEM 不含蛋白质、脂质或生长因子。因此，DMEM 需要补充剂，通常添加 10% 胎牛血清 (FBS)。DMEM 使用碳酸氢钠缓冲系统 (3.7 g/L)，因此需要 5–10% CO2 的环境来维持生理 pH 值。

一、基础成分

基础培养基的配方经过优化，具有以下特点：

• 营养成分：含全面的必需氨基酸、非必需氨基酸（如谷氨酰胺）、维生素（包括高浓度叶酸）、葡萄糖、丙酮酸（额外碳源）及矿物质，能满足细胞能量代谢和生物合成需求；

• 缓冲系统：依赖碳酸氢钠（通常 2.2 g/L）维持 pH 稳定，需在 5%-10% CO₂培养箱中使用，pH 范围约 7.2-7.4；

1. 主要优势

1. 广谱适用性：既能支持原代细胞（如成纤维细胞、上皮细胞、淋巴细胞），也能培养传代细胞系（如肿瘤细胞），尤其对悬浮细胞和半贴壁细胞的兼容性较好；

2. 营养丰富：适用于代谢旺盛、增殖快的细胞，如大多数肿瘤细胞系、杂交瘤细胞、胚胎干细胞等，能为它们提供充足的能量。

3. 稳定性强：缓冲系统在一定范围内可抵抗 pH 波动，适合长时间培养（如 7-10 天的原代细胞分离培养）；

4. 支持细胞分化与功能维持：相比高营养的增殖型培养基，其配方更利于原代细胞保持原有表型和功能（如肝细胞的代谢功能）。

使用注意事项

• CO₂浓度：需在 5% CO₂培养箱中使用，确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作，维持 pH 稳定。

• 使用前预热：从冰箱取出后，应提前置于室温或37℃水浴中充分预热，避免温度骤变对细胞造成冲击。

• 严格无菌操作：开封使用时注意无菌，建议分装保存，避免反复冻融或污染。

• 注意组分稳定性：L-谷氨酰胺等成分会随时间降解，配制好的完全培养基应尽快使用 。

• 细胞适应性：若从其他培养基更换为本培养基，建议逐步过渡（如先混合 50% 旧培养基，再逐渐提高比例），避免细胞应激。

• 无菌操作：配制和使用过程严格无菌，避免污染（定期检测培养基是否浑浊、变色）。

• 储存条件：常温运输；2-8℃避光保存，有效期12个月。

• 重要提示

• 产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

• 由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

适用细胞类型与场景原代细胞培养

• 动物组织来源的原代成纤维细胞、上皮细胞（如皮肤、肾脏原代细胞）；

• 造血系统细胞（如淋巴细胞、巨噬细胞）及骨髓基质细胞。

1. 肿瘤细胞系培养

• 多种肿瘤细胞，尤其适合需要模拟体内微环境的肿瘤研究；

• 转化细胞系（如病毒转化的淋巴细胞）。

2. 特殊实验需求

• 细胞毒性检测（药物筛选中，其稳定的环境利于准确评估细胞存活）；

• 病毒培养（如某些逆转录病毒在该培养基中增殖效率较高）；

• 长期细胞培养（如原代细胞的传代扩展或功能维持实验）。