低生长因子基质胶（无酚红）5mL

低生长因子基质胶（无酚红）是从富含胞外基质蛋白的EHS（Engelbreth-Holm-Swarm）小鼠肿瘤中提取出的可溶性基底基质。本品不含酚红，在基础基质胶基础上，对生长因子含量做减量处理。与标准型相比，其经特殊纯化处理，生长因子含量显著降低。其可减少细胞因子本底干扰，适宜针对细胞因子信号通路等对基质成分要求严格的实验。其主要成分由层粘连蛋白（Laminin），Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ），巢蛋白（Entactin）和硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（Heparan sulphate proteoglycans）等组成，同时还包含表皮生长因子（EGF）、转化生长因子（TGF-beta）、类胰岛素生长因子（IGF）、成纤维生长因子（FGF）、组织纤溶酶原激活物和EHS肿瘤自身含有的其他生长因子。在室温条件下，基质胶可快速聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的组成、结构以及物理特性和功能，可促进体外细胞如：上皮细胞、血管内皮细胞、黑色素瘤细胞以及干细胞等的增殖和分化，在研究细胞形态、生理功能、侵袭以及促进难成瘤细胞成瘤等方面具有重要作用。

基本成分：其是从富含胞外基质蛋白的 EHS（Engelbreth-Holm-Swarm）小鼠肿瘤中提取的，主要成分是层粘连蛋白，还含有 IV 型胶原、硫酸肝素糖蛋白、巢蛋白、组织纤溶酶原激活物、微量的基质金属蛋白酶及种生长因子等。同时，其不含有酚红成分，不含乳糖脱氢酶增高病毒（LDEV）。

• 生长因子特性：与标准型相比，其经特殊纯化处理，生长因子含量显著降低。其可减少细胞因子本底干扰，适宜针对细胞因子信号通路等对基质成分要求严格的实验。

• 外观形态：半透明淡黄色。

• 蛋白浓度：蛋白浓度一般与标准型相近，通常处于 8 至 13mg/ml

• 无酚红干扰：不含酚红，避免了酚红对实验结果的干扰，尤其适用于荧光检测、显色反应等需要颜色检测的实验，以及对细胞内信号通路、细胞因子等进行研究时，可更准确地分析实验结果。

储存与运输

• 干冰运输，-20 ℃避光保存，有效期2年；避免反复冻融。初次解冻后请适当分装储存于-20 ℃冰箱，请不要储存于无霜冰箱中。

• 实验过程中，请将本产品全程保持在冰上，4℃恒温解冻，避免频繁开关冰箱门造成影响。如果产品出现凝固，则产品不可继续使用。

一、使用前准备

1. 材料与试剂准备

• 低生长因子基质胶（无酚红，-20℃或 - 80℃保存）、无菌离心管、移液枪及无菌吸头、培养板 / 培养皿、预冷的基础培养基（如 DMEM、PBS）、待培养细胞（提前消化并计数）。

• 所有接触基质胶的容器（离心管、吸头、培养板）需提前 4℃预冷，避免基质胶遇温凝固。

2. 基质胶融化

• 从低温冰箱取出基质胶，立即置于 4℃冰箱过夜融化（约 12-16 小时），禁止室温或 37℃水浴融化，以免提前聚合。

• 融化后若需分装（避免反复冻融），需在冰上操作，按单次用量分装至预冷离心管，分装后迅速放回 - 20℃或 - 80℃保存。

二、具体操作步骤（以 3D 细胞培养为例）

1. 基质胶稀释（按需）

• 若需降低浓度，用预冷的基础培养基在冰上稀释（比例依据实验需求，如 1:1、1:2 等），轻柔混匀（避免剧烈摇晃产生气泡）。

  
  

2. 铺胶

• 取预冷的基质胶（或稀释液），按实验需求加入预冷的培养板孔中（如每孔 50-100μl），避免产生气泡（若有气泡可轻轻吸除）。

• 立即将培养板放入 37℃、5% CO₂培养箱中，静置 30-60 分钟，待基质胶完全聚合（呈半透明固态）。

3. 接种细胞

• 消化后的细胞用培养基重悬，调整密度后，缓慢滴加至聚合好的基质胶表面（避免冲散基质胶），每孔细胞悬液体积根据培养板规格调整（如 24 孔板每孔 500μl）。

• 放回培养箱培养，后续换液时需轻柔操作，避免破坏基质胶结构。

4. 其他实验操作（如 Transwell 侵袭实验）

• 提前用预冷培养基稀释基质胶，加入 Transwell 上室（如每孔 50μl），37℃聚合 30 分钟。

• 上室接种细胞悬液，下室加入含趋化因子的培养基，培养后检测细胞侵袭能力。

三、注意事项

1. 温度控制

• 基质胶在 4℃为液态，37℃快速聚合，全程需在冰上或 4℃环境中操作（除聚合步骤外），避免室温放置导致提前凝固。

2. 避免反复冻融

• 首次融化后建议分装，反复冻融会破坏基质胶成分（如蛋白结构），影响聚合效果和细胞相容性。

3. 外源性生长因子补充

• 因生长因子含量低，部分细胞（如干细胞、原代细胞）可能需要额外添加特定生长因子（如 EGF、bFGF）以维持存活或促进分化，具体浓度需预实验验证。

4. 储存条件

• 未开封或分装的基质胶需于 - 20℃（短期）或 - 80℃（长期）保存，避免反复冻融；4℃融化后的基质胶若未使用，可短期（1-2 天）4℃保存，但需尽快使用。

四、常见问题及解决

• 基质胶不聚合：可能因温度未达 37℃或操作时混入低温液体，需确保培养箱温度稳定，聚合时避免频繁开关箱门。

• 细胞生长不佳：可能因基质胶浓度不适或缺乏必要生长因子，可调整稀释比例或补充外源性因子。

重要提示

产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

警告！产品对人体危害性未知，请遵循操作说明。穿戴适当的防护眼镜、衣服和手套！

细胞生物学研究

• 3D 细胞培养与类器官构建
  适用于对生长因子敏感的细胞（如干细胞、原代细胞）的三维培养。低生长因子特性可减少内源性因子对细胞分化的干扰，便于研究者通过外源性添加特定因子精准调控细胞命运。例如：

• 干细胞（如胚胎干细胞、诱导多能干细胞）的定向分化研究，可避免基质胶自身因子误导分化方向。

• 类器官培养（如肠道、脑、肝脏类器官），能更接近体内微环境的 “低干扰” 状态，维持类器官的结构稳定性和功能特异性。

• 细胞侵袭与迁移实验
  在 Transwell 侵袭实验中，作为基底膜模拟基质，低生长因子特性可排除基质自身因子对细胞迁移能力的干扰，更精准反映细胞（如肿瘤细胞、内皮细胞）的自主侵袭能力，常用于评估药物对细胞迁移的抑制或促进作用。

2. 肿瘤研究

• 肿瘤微环境模拟
  用于构建肿瘤细胞 3D 模型，低生长因子基质胶可减少对肿瘤细胞增殖、凋亡的 “额外刺激”，更真实模拟肿瘤在体内的生长状态，便于研究肿瘤细胞的代谢、耐药性及对治疗的响应。

• 体内成瘤与转移模型
  与肿瘤细胞混合后接种动物（如裸鼠皮下），可提升成瘤效率，同时因生长因子含量低，能减少对肿瘤细胞自身增殖信号的干扰，更准确反映肿瘤的恶性程度及转移潜能。

3. 血管生成研究

• 体外血管生成模型
  支持内皮细胞（如人脐静脉内皮细胞 HUVEC）的成管实验，低生长因子特性可降低基质自身因子对血管生成的 “背景干扰”，便于研究者通过外源性添加 VEGF、bFGF 等因子，精准研究血管生成的调控机制，或筛选血管生成抑制剂 / 促进剂。

• 血管通透性研究
  可构建血管内皮细胞单层模型，结合其 3D 结构模拟血管壁基底膜，用于研究血管通透性变化及相关疾病（如炎症、肿瘤血管渗漏）的机制。

4. 药物研发与筛选

• 药物敏感性测试
  在 3D 细胞模型中，低生长因子基质胶构建的微环境更接近体内状态，可用于评估药物对细胞（尤其是肿瘤细胞、干细胞）的杀伤效果或毒性，提高药物筛选的准确性。

• 信号通路研究
  因内源性生长因子含量低，可减少对细胞信号通路（如 PI3K/Akt、MAPK 等）的非特异性激活，适合研究特定生长因子或药物对信号通路的调控作用，结果更具特异性。