品牌 | EanGul/研谷 | 货号 | B1007D |
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规格 | 500mL | 价格 | 360 |
供货周期 | 现货 | 说明书 | 点击下载 |
MDCK(Madin-Darby Canine Kidney)细胞是一种犬肾上皮细胞系,广泛应用于病毒疫苗生产(如流感疫苗)、病毒学研究及药物筛选。传统培养方式依赖含血清培养基,但无血清培养基(Serum-Free Medium, SF批次稳定性高、减少污染风险、简化下游纯化等优势,正逐渐成为主流选择。
特点:
✅ 无血清,无动物源成分
- 避免血清批次差异,提高实验可重复性。
- 降低外源病原体(如支原体、病毒)污染风险。
✅ 支持高密度培养
- 优化配方可支持细胞密度达 5-8×10⁶ cells/mL(悬浮培养)。
- 部分产品支持贴壁直接转悬浮,无需长期驯化。
✅ 病毒生产效率高
- 适用于流感病毒(H1N1、H5N1等)、腺病毒等的高效扩增。
✅ 低内毒素 ,无菌,无支原体,无病毒。
使用方法
细胞适应(驯化)
渐进适应法(推荐):
1. 初始使用 50%原培养基 + 50%无血清培养基 混合培养。
2. 每代提高无血清比例至100%,监测细胞活率(需≥90%)。
直接转换法:贴壁细胞可直接更换为无血清培养基。
病毒接种优化
- 最佳接毒时间:细胞密度达 3-5×10⁶ cells/mL 时接种病毒。
- 收获时间:通常感染后48-72小时(视病毒类型调整)。
细胞冻存
- 冻存密度:
- 含血清冻存:15-20×10⁶ cells/mL(推荐40%培养基+50%FBS+10%DMSO)。
- 无血清冻存:30-40×10⁶ cells/mL(推荐45%培养基+45%上清+10%DMSO)。
- 程序降温:使用冻存盒(-80°C 24h后转移至液氮)。
注意事项
⚠ 细胞状态监测:定期检测活率(≥90%)和支原体污染(推荐PCR法)。
⚠ 培养基储存:液体2-8°C避光保存,干粉需复溶后过滤除菌。
⚠ 规模化生产:需优化生物反应器参数(如溶氧、搅拌速度)。
重要提示
产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。