M199完全培养基

   M199 完全培养基（Medium 199 Complete Medium）是以M199 基础培养基为核心，添加血清、抗生素等成分形成的细胞培养体系。M199 由 Morgan 等于 1950 年研发，是最早含全部已知维生素和多种有机化合物的合成培养基之一，因营养成分全面，尤其适合原代细胞、上皮细胞及疫苗生产相关细胞的培养，在病毒学、组织工程等领域应用广泛。产品使用便捷，无需额外添加其他成分，开盖即用。省去客户自行配液的麻烦和污染风险。

特点：

125mlx4小包装规格，随用随取。

无需额外添加，开盖即用，方便快捷。

无菌，无病毒，无支原体，低内毒素

无需再次配置，减少污染风险

一、基础成分

M199 基础培养基的显著特点是营养成分极其丰富且全面，涵盖多种维生素、氨基酸、核苷酸前体及微量元素，具体包括：

• 维生素种类齐全：包含生物素、叶酸、维生素 B12、维生素 C 等 20 余种维生素（远超 DMEM 等培养基），尤其适合对维生素需求高的细胞（如上皮细胞、内皮细胞）；

• 氨基酸与代谢物：含 13 种必需氨基酸和 9 种非必需氨基酸，以及次黄嘌呤、胸腺嘧啶等核苷酸合成前体，支持细胞核酸代谢；

• 其他成分：含葡萄糖（5.5 mM，属于低糖范围）、丙酮酸（0.1 mM）、磷酸胆碱、胆固醇等脂质前体，可满足部分细胞的脂类合成需求；

• 缓冲系统：主要依赖碳酸氢钠（2.2 g/L），需在 5%-10% CO₂环境中维持 pH 稳定（通常推荐 5% CO₂），部分商品化配方会添加 HEPES（10-25 mM）增强缓冲能力。

二、添加组成

完全培养基在基础培养基的基础上添加以下关键成分，使其具备支持细胞生长的完整功能，血清，抗生素，HEPES等特殊需求可支持定制。

1. 血清（默认特级胎牛血清，其他等级胎牛血清可选）

• 作用：提供天然生长因子（如 EGF、胰岛素）、激素、黏附因子、微量元素等，促进细胞增殖和存活，同时增强培养基的缓冲能力。

• 默认添加比例：10%（部分敏感细胞需 5%-20%可选，如原代细胞；无血清培养时可替换为血清替代物）。

2. 抗生素（可选，预防污染）

• 常用组合：青霉素（100 U/mL）+ 链霉素（100 μg/mL），抑制细菌污染；若需抗真菌，可添加两性霉素 B（0.25 μg/mL）。

• 注意：长期使用可能影响细胞活性，清洁实验环境下可省略。

3. 其他补充物（可选）

• 谷氨酰胺：部分基础培养基不含或含不稳定的 L - 谷氨酰胺，需额外添加（终浓度 2 mM），为细胞提供氮源和能量代谢中间物。

  
  

• 特定生长因子：如培养淋巴细胞时添加 IL-2，根据细胞类型定制。

4. 适用细胞类型

5. M199 完全培养基因营养全面，尤其适合对环境敏感或需求复杂的细胞：

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7. 原代细胞：如原代上皮细胞（角膜上皮、乳腺上皮）、内皮细胞（血管内皮、脐静脉内皮 HUVEC）、成纤维细胞等，能更好地维持其原代特性；

8. 疫苗生产相关细胞：如鸡胚成纤维细胞、Vero 细胞（非洲绿猴肾细胞），常用于病毒（如脊髓灰质炎病毒、流感病毒）的培养和疫苗制备；

9. 内分泌细胞：如垂体细胞、胰岛细胞，可支持其激素合成和分泌功能；

10. 其他敏感细胞系：如平滑肌细胞、神经胶质细胞等，在 M199 中生长状态优于普通 DMEM。

使用注意事项

• CO₂浓度：需在 5% CO₂培养箱中使用，确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作，维持 pH 稳定。

• 无需额外添加： 本产品为全营养组分的培养基，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接使用。

• 细胞适应性：若从其他培养基更换为本培养基，建议逐步过渡（如先混合 50% 旧培养基，再逐渐提高比例），避免细胞应激。

• 无菌操作：配制和使用过程严格无菌，避免污染（定期检测培养基是否浑浊、变色）。

• 储存条件：完全培养基：4℃避光保存，有效期三个月，避免反复冻融或长时间室温放置（防止营养成分降解和污染）。

• 重要提示

• 产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

• 由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

M199 完全培养基以其全面的营养成分和对敏感细胞的良好支持，成为原代细胞培养、疫苗生产及内分泌细胞研究的经典选择。