神经元细胞培养基 1L

  神经元细胞培养基是一种基础培养基，设计用于纯产前和胚胎神经元细胞群的长期维持和成熟，在与  B-27 补充剂配合使用时无需星形胶质细胞滋养层。培养基适用于大多数神经元细胞应用。

特点：  

神经保护机制：减少神经元过度激活和兴奋性毒性，显著提升原代神经元存活率（大鼠胚胎海马神经元培养4周存活率>90%）。  胶质细胞抑制：配合B-27添加剂时，培养5天后胶质细胞污染率<0.5%，实现高纯度神经元群落。

无需饲养层：独立支持神经元生长，简化培养流程。

添加剂依赖：需搭配专用添加剂以替代血清功能：  

     | 添加剂类型 | 适用细胞                  | 关键作用               |  

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     | B-27（含维A）  | 海马/皮层神经元              | 抗氧化、促突触成熟       |  

     | B-27（无维A） | 神经干细胞                   | 维持未分化状态           |  

     | N-2            | 神经母细胞瘤/PNS神经元       | 支持有丝分裂后细胞存活  

根据培养目的，需额外添加以下成分：

• 神经营养因子：促进神经元存活、分化和突触形成，如：

• NGF（神经生长因子）：支持外周神经元（如交感神经元、背根神经节神经元）。

• BDNF（脑源性神经营养因子）：促进中枢神经元（如海马、皮层神经元）的存活和突触成熟。

• GDNF（胶质细胞源性神经营养因子）：支持多巴胺能神经元等。

• 抗污染成分：常规添加青霉素（100 U/mL）+ 链霉素（100 μg/mL），避免细菌污染；真菌污染风险高时可加两性霉素 B。

• 能量与代谢支持：

• 谷氨酰胺（2 mM）：神经元能量代谢的关键底物，但易分解产生氨（有毒性），因此更推荐使用稳定型 GlutaMAX™。

• 葡萄糖（5-25 mM）：根据细胞类型调整（如成熟神经元对葡萄糖更敏感，需控制浓度）。

神经元细胞培养的关键注意事项

1. 无菌操作：神经元对污染极敏感，需在超净台严格无菌操作，培养基开封后需分装保存（避免反复冻融）。

2. 培养环境：37℃、5% CO₂、95% 湿度的培养箱，定期校准温度和 CO₂浓度（CO₂影响 pH，过高 / 过低会导致细胞死亡）。

3. 换液频率：神经元代谢较慢，无需频繁换液，通常每 3-4 天半量换液（保留一半旧培养基，避免营养剧烈波动）。

4. 抑制杂细胞：原代培养中胶质细胞（如星形胶质细胞）增殖快，会竞争营养，可在培养第 3-5 天添加阿糖胞苷（Ara-C，终浓度 5-10 μM），抑制胶质细胞 DNA 合成（神经元不增殖，不受影响）。

5. 避免机械刺激：换液时吸管需沿壁缓慢加液，避免直接冲击细胞；培养板移动时轻拿轻放，减少震动对神经元的损伤。

6. 重要提示

7. 产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

8. 由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。