简要描述:BCA(Bicinchoninic acid)法是目前应用比较广泛的蛋白质浓度测定方法。基于双缩脲反应,原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。试剂盒中提供的蛋白标准品为用户制作标准曲线提供了便利。该BCA蛋白浓度测定试剂盒可用于比色皿法检测,也可用于微孔板法检测。
品牌 | EanGul/研谷 | 货号 | F2001D |
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规格 | 2500T | 价格 | 1658 |
供货周期 | 现货 | 说明书 | 点击下载 |
产品介绍
BCA(Bicinchoninic acid)法是目前应用比较广泛的蛋白质浓度测定方法。基于双缩脲反应,原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。试剂盒中提供的蛋白标准品为用户制作标准曲线提供了便利。该BCA蛋白浓度测定试剂盒可用于比色皿法检测,也可用于微孔板法检测。
特点
l 灵敏度高,最小检测蛋白量可达0.2μg,检测浓度下限达到10μg/mL(在20~1000μg/ml 浓度范围内有较好的线性关系)。
l 速度快,比一般的BCA蛋白浓度测定试剂盒显色所用时间短,比传统的Lowry法检测速度约快4倍。
l 线性范围广,20-1000μg/mL浓度范围内有较好的线性范围。
l 不受大部分样品中的化学物质的影响, BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂, 可以兼容样品中高达 5%的SDS; 5%的Triton X- 100; 5%的Tween 20、 60、 80。
储存事项
试剂A和B室温贮存;牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存;PBS溶液4℃贮存。本试剂盒有效期1年。
使用说明详情见说明书
注意事项
BCA蛋白测定法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,显色反应的速度和温度有关,需注意保持定时和定温,以确保精确定量。
长期保存,若发现BCA试剂A或者试剂B有沉淀发生,请在37ºC温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如发现细菌污染,则应丢弃。
受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于 10mM ,无EGTA ,二硫苏糖醇低于 1mM; β-巯基乙醇低于 0.01%。
实验操作规范,提高上样量的精确度。
每次测定都需做相应的标准曲线,因为显色反应与温度和时间的变化有关,精准蛋白定量宜每次都做标准曲线。
总之,BCA 蛋白定量试剂盒凭借操作简便、灵敏度较高(通常可检测 μg/mL 级别的蛋白质)、抗干扰能力较强(对去垢剂等物质的耐受性优于 Lowry 法)等特点,成为各类涉及蛋白质定量的实验场景中的重要工具。