超敏ECL化学发光底物试剂盒 A50mL+B50mL

产品介绍 

  超敏 ECL 化学发光底物试剂盒是一种用于检测免疫印迹膜上辣根过氧化物酶（HRP）的高灵敏的增强底物。本试剂 盒使用了新型高效增强剂，发光强度比传统 ECL 显色液显著提高，并有效降低了背景。这一独特的发光底物系统是目前 最常用的商业化荧光 ECL 检测试剂，具有极高灵敏度和高信噪比。可实现低皮克或高飞克级别抗原检测。该反应产生延 长的化学发光，其可在 X 射线胶片或成像系统上可视。 

特点 

 发光迅速，通常 1～5 秒瞬时即出结果。

 具有极高灵敏度和高信噪比，可检测 10～100 fg 级抗原。 

 可在日光灯下进行发光操作，短时间暴露于实验室常规照明不会损害该工作液。 

 发光持续时间长，荧光可使 X 光胶片感光达 12 小时以上，特别适用于痕量蛋白或核酸检测。 

 可使用更高的二抗稀释倍数(1:20000～1:100000)，极其节省抗体，抗体使用量通常比普通 ECL 低 10-50 倍。

 稳定性高，抗干扰能力强。

储存事项 

冰袋运输，短时间内可室温运输，但需避免光源热源；长时间储存请放置于 4℃避光保存。有效期 24 个月。

操作步骤详情见说明书

注意事项

• A 液和 B 液在吸取过程中必须更换枪头，两种溶液相互污染后会导致逐渐失效，影响后续的使用效果。

• 使用过程中，建议现配现用，配制后室温放置数小时后灵敏度会降低。

• 各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效，如有条件，可以收到货第一时间分装成小规格，避免每次开盖增加曝光及挥发频率。

• 不同级别 ECL 的荧光持续时间不同，一般开始反应后的 30 分钟内荧光更强一些，因此请注意充分利用这荧光较强的 30 分钟进行压片。

• 为获得最佳显色效果，必须优化该系统的全部组分，包括样品量、一抗和二抗浓度以及膜和封闭试剂的类型。

• 使用该产品比使用沉淀比色 HRP 底物检测所需的抗体浓度低，为优化抗体浓度，请进行一次系统斑点印迹分析.

• 封闭试剂有可能与抗体产生交叉反应，导致出现非特异性信号。封闭缓冲液同时也会影响系统的灵敏性，当从一种底物转换为另一种底物时，有时会出现信号衰减或背景增加的现象，原因可能是封闭缓冲液不适合新的检测系统。

• 使用亲和素/生物素检测系统时，避免使用脱脂奶粉（含内源性生物素），推荐无蛋白封闭液；否则会导致高背景信号。

• 保证洗涤缓冲液、封闭缓冲液、抗体溶液和底物工作液的使用体积，以确保在整个实验过程中印迹膜完全被液体覆盖，避免膜变干。增大封闭缓冲液及洗涤缓冲液的使用量可以降低非特异性的信号。

• 为获得最佳效果，在孵育步骤请使用摇床。

• 将 Tween20(终浓度 0.05%～0.1%)加入封闭缓冲液和稀释的抗体溶液，以降低非特异信号。

• 不要使用叠氮化钠（NaN₃ ）作为缓冲液的防腐剂，叠氮化钠是 HRP 的抑制物。

• 避免手与膜直接接触，实验过程应戴手套或使用干净的镊子。

• 所有设备必须清洁且不沾染外来物质，金属器械（如剪刀）不得具有可见的锈迹，锈迹可能导致斑点形成和高背

• 使用本产品的抗体参考稀释范围：

• 一抗稀释范围为1 mg / mL原液	二抗稀释范围为1 mg / mL原液
  1:1,000-1:5,000 或 0.2-1.0 µg/mL	1:20,000-1:100,000 或 10-50 ng/mL

  
  

  
  

  重要提示

  产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

  由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

  警告！产品对人体危害性未知，请遵循操作说明。穿戴适当的防护眼镜、衣服和手套！

  
  常见问题指南

  
  

  
  

  
  

发光液是一种基于辣根过氧化物酶（HRP）催化反应的化学发光底物，广泛应用于生物医学研究中痕量蛋白或核酸的检测。其核心应用领域如下：

一、蛋白质印迹（Western Blot）

这是ECL发光液最经典的应用场景，通过HRP标记的二抗与目标蛋白结合，催化发光底物产生信号。  

实例： 

检测Hela细胞中GAPDH蛋白（1:1000稀释一抗）；  

对比A549细胞AKT蛋白表达（超敏ECL vs. 竞品）。  

二、核酸杂交分析  

ECL发光液也用于HRP标记探针的核酸杂交实验，包括：  

1.Southern Blot（DNA检测）  

2.Northern Blot（RNA检测）  

3.EMSA（电泳迁移率变动实验）：研究蛋白核酸相互作用（如转录因子结合DNA）。  

特点：发光信号使X光胶片感光长达12小时，适合痕量核酸靶标（如突变基因、病毒RNA）的检出。  

三、其他应用领域  

1.斑点杂交（Dot Blot）：  

直接检测膜上固定的蛋白或核酸，无需电泳分离，快速筛查样本。  

2.免疫组化（IHC）的膜检测变体：  

结合HRP标记抗体，用于膜上抗原的化学发光成像。  

3.全自动化学发光成像系统：  

适配自动化设备，实现高通量检测（如Super ECL发光液）。