碘化丙啶（PI)

英文名：Propidium iodide (PI)
产品价格：￥119

简要描述：荧光染料PI（碘化丙啶）是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测，英文全称是Propidium Iodide。它是一种溴化乙啶的类似物，在嵌入双链DNA后释放红色荧光。尽管PI不能通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。

货号	规格	价格
D7002D	10mL	119

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品牌	EanGul/研谷	货号	D7002D
规格	10mL	价格	119
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荧光染料PI（碘化丙啶）是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测，英文全称是Propidium Iodide。它是一种溴化乙啶的类似物，在嵌入双链DNA后释放红色荧光。尽管PI不能通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。PI经常被用来与Calcein-AM或者FDA等荧光探针一起使用，能同时对活细胞和死细胞染色。PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535 nm和615 nm。

1. 化学特性

- 分子式：C₂₇H₃₄I₂N₄，分子量：668.39，CAS号：25535-16-4。

- 外观：红色至暗红色结晶粉末，易吸潮，对光敏感，需避光保存（2~8℃充氩保存）。

- 溶解性：

- 水溶性：1–2 mg/mL（pH 7.4 PBS）；

- 有机溶剂：溶于DMSO（2.5 mg/mL）、乙醇（0.2 mg/mL），不溶于非极性溶剂。

2. 作用原理

- 核酸结合特性：通过嵌入双链DNA/RNA的碱基对间，无序列偏好性（每4–5个碱基结合一个PI分子），结合后荧光强度增强20–30倍。

- 光谱变化：

| 状态 | 最大激发波长（nm） | 最大发射波长（nm） |

|----------------|-------------------|-------------------|

| 游离PI | 493 | 636 |

| 核酸结合态 | 535 | 617 |

- 膜通透性：

- 无法穿透完整细胞膜（活细胞拒染）；

- 可进入膜破损细胞（死细胞/晚期凋亡细胞），实现特异性死细胞染色。

使用说明

使用方法

1. 溶液配制

储存液：用去离子水或 PBS 配制 1-10 mg/mL 的浓缩液，0.22 μm 滤膜过滤除菌，分装后于 **-20℃避光保存 **（可稳定 1 年以上，避免反复冻融）。
工作液：使用前用缓冲液（如 PBS、培养基）稀释储存液，常规浓度为1-5 μg/mL（根据实验需求调整，如活细胞染色可适当降低浓度至 0.1-1 μg/mL 以减少毒性）。

2. 染色步骤

固定细胞染色（推荐）：
1 细胞经甲醛或多聚甲醛固定（10-30 分钟），PBS 洗涤 2-3 次；
2（可选）用 0.1% Triton X-100 透化处理 5-10 分钟（增强染料对细胞核的穿透性），PBS 洗涤；
3 加入 DAPI 工作液，室温避光孵育 5-15 分钟；
4 PBS 洗涤 2-3 次以去除未结合的染料，即可进行荧光成像。
活细胞染色：
直接向培养基中加入 DAPI 工作液（终浓度 0.1-1 μg/mL），37℃孵育 5-30 分钟，洗涤后观察（注意：长时间孵育可能对活细胞产生毒性，建议缩短染色时间）。