T细胞无血清培养基（500mL)

   T细胞无血清培养基（SFM-T）是一款专为T细胞培养而设计的无血清（Serum-Free）、无异源动物源成分的T细胞维持和扩增培养基。专为人 T 细胞体外扩增、活化和长期培养而优化设计，本产品无需添加外源血清或细胞因子即可支持免疫细胞的高活力增殖与功能维持。和传统的含血清培养基相比，无血清培养基的设计大大降低了在T细胞培养过程中引入异源感染物的风险，提高了培养基批次间的一致性，并且避免了血清中的不明确成分可能导致的T细胞过度激活以及细胞耗竭，适用于 CAR-T、TCR-T、TIL等细胞治疗 等临床级生产工艺，有利于进行临床及大规模转化。 

特点

1.支持T细胞稳健增殖，高活率、高扩增、高纯度、高杀伤功能

2.无血清/无动物成分：避免批次差异和病原体污染风险。

3.高扩增效率：支持 T细胞 >1000 倍扩增（依赖初始细胞与刺激条件）。

4.适用于CAR-T、TCR-T、TIL、T细胞等免疫细胞的长期扩增（>14天）

5.完全自主研发，供货稳定，GMP级别

使用步骤

1. 分离外周血单核细胞（PBMC）：使用肝素抗凝采集外周血，通过密度梯度离心法（常用淋巴细胞分离液）从血液中分离出PBMC。

2. 培养器皿包被（若需激活T细胞）：许多实验方案需要先用抗CD3抗体包被培养瓶/板，以激活T细胞。通常用PBS将抗体稀释到工作浓度（如1-5 μg/mL）加入器皿，室温或4℃孵育1小时或过夜，之后吸弃包被液并用PBS洗涤一次。

3. 制备完全培养基：在基础T细胞无血清培养基中，根据需要加入必要的细胞因子（最常用的是IL-2，浓度范围可能在100-1000 IU/mL，例如700 IU/mL）。在培养初期（如前3-5天），有时会添加少量自体血浆（如5%-10%）。

4. 接种与培养：将分离得到的PBMC用完全培养基重悬，以适当的初始密度（例如 1*10⁶ cells/mL）接种到经过包被（若需）的培养器皿中。置于 37℃, 5% CO₂ 的饱和湿度培养箱中培养。

5. 换液与扩增：

• 培养2-3天后，可补充新鲜的完全培养基（含细胞因子）或进行半换液。

• 根据细胞生长密度，定期进行传代或扩增，保持细胞处于最佳生长密度。过程中细胞因子需持续补充。

6. 细胞收获：当细胞扩增到所需数量和质量时，通常通过离心（如500xg, 10分钟）收获细胞。用适当的缓冲液（如含白蛋白的生理盐水或PBS）洗涤细胞1-2次，最后重悬于合适的溶液中进行计数、表型鉴定或下游应用。

储存条件

未开封状态：所有产品均需 2–8℃冷藏避光保存，有效期一般为 12个月

开封后：基础培养基需在 2–8℃避光保存，有效期缩短至 1个月 

注意事项

1. 储存与稳定性：

• T细胞无血清培养基需在 2-8°C条件下避光保存，切勿冷冻，以免导致成分析出或失效。

• 开封后，建议在2-3周内使用完毕。

• 使用前应将其恢复至室温（或37℃水浴预热），并检查是否有沉淀或异常变色。如有异常，应停止使用。

2. 无菌操作：

• 所有操作都应在超净工作台或生物安全柜中，严格遵守无菌操作规程，避免微生物污染。

• 虽然产品本身经过无菌处理，但开封后接触空气和器械，污染风险增加。

3. 细胞因子与添加剂：

• 培养基的性能高度依赖于正确添加适当浓度的细胞因子（特别是IL-2）和其他必要的添加剂。务必根据实验目的和细胞状态优化添加剂的浓度和组合。

• 添加细胞因子后，完全培养基的稳定性可能会发生变化，建议现配现用。

4. 细胞状态监测：

• 在培养过程中，需要定期在显微镜下观察细胞的形态、密度和活性（如台盼蓝染色计数）。

• 可根据实验需求，定期取样进行细胞计数、活力测定和流式细胞术分析，以监测T细胞亚群的比例和功能状态。

重要提示

产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。