品牌 | EanGul/研谷 | 货号 | D4016D |
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规格 | 1g | 价格 | 1980 |
供货周期 | 现货 | 说明书 | 点击下载 |
灭瘟素S盐酸盐Blasticidin S hydrochloride 是从 Streptomyces griseochromogenes 中分离的核苷抗生素,可抑制原核生物,真菌,植物和哺乳动物细胞的细胞生长,是一种常用抗生素,也是DNA和蛋白质合成的抑制剂,可用于筛选携带brs或BSD抗性基因的转染细胞。
- 化学信息:
- 分子式:C₁₇H₂₇ClN₈O₅(盐酸盐形式)
- 分子量:458.9 g/mol
- CAS号:3513-03-9
- 外观:白色至类白色结晶粉末
- 溶解性:易溶于水(92 mg/mL,约200 mM),不溶于DMSO和乙醇。
- 来源:从灰色链霉菌(Streptomyces griseochromogenes)中分离的核苷肽类抗生素。
2. 作用机制
- 抑制蛋白质合成:通过阻断核糖体肽键形成,干扰肽基-tRNA水解,抑制原核和真核细胞的蛋白质合成。
- 抑制DNA合成:独立于蛋白质合成抑制途径,直接干扰DNA复制。
- 金属离子结合:可结合Cu(II)离子,保护DNA免受金属诱导损伤。
使用浓度指南
| 细胞类型 | 推荐浓度范围 | 典型应用案例 |
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| 大肠杆菌 | 25–100 μg/mL | 低盐LB平板筛选 |
| CHO细胞 | 5–10 μg/mL | DMEM培养基 |
| HEK293细胞 | 5–15 μg/mL | DMEM培养基 |
| 神经母细胞瘤 | 30 μg/mL | Neuro2a细胞系 |
| THP-1单核细胞 | 10 μg/mL | RPMI培养基 |
> 注:首次使用需通过灭杀曲线(Kill Curve)确定最佳浓度:梯度测试(0–10 μg/mL),选择7–10天内杀死未转染细胞的最低浓度。
配制与保存
- 溶液配制:
- 母液:10 mg/mL溶于HEPES缓冲液(pH 7.4–7.5),经0.22 μm滤膜除菌。
- 工作液:用培养基稀释至目标浓度,避免有机溶剂(如DMSO)。
- 保存条件:
- 粉末:-20℃保存,有效期≥2年。
- 溶液:-20℃避光保存,避免反复冻融(有效期6个月)。
毒性及安全注意事项
- 高毒性:急性经口毒性(类别1),操作需穿戴实验服、手套及口罩。
- 细胞毒性:浓度>50 μg/mL可能影响敏感细胞活力,需优化剂量。
- 禁用场景:仅限科研,禁止用于临床、食品或药品。
与其他抗生素对比
- 筛选速度:比G418更快杀死非转染细胞(3–7天 vs. 7–14天)。
- 抗性基因兼容性:可与潮霉素B、嘌呤霉素等联用,用于多基因筛选。
主要应用
(1)细胞筛选
- 抗性基因:用于筛选携带 bsr(细菌来源)或 BSD(霉菌来源)抗性基因的转染细胞。
- 适用细胞类型:
- 哺乳动物细胞:常用浓度 1–50 μg/mL(如HEK293: 5–15 μg/mL;HeLa: 2.5–10 μg/mL)。
- 大肠杆菌:常用 25–100 μg/mL(需在低盐LB培养基、pH 8.0下增强活性)。
- 其他真核细胞:植物细胞、昆虫细胞等。
(2)筛选优势
- 快速高效:未转染细胞在低浓度下迅速死亡(通常<7天),加速稳定细胞系建立。
- 低浓度生效:哺乳动物细胞敏感度高达2 μg/mL,优于其他抗生素(如G418)。